Autoclave(오토클레이브)

* 살균과 멸균의 차이

 - 살균 : 따로 규정이 없는 한 세균, 효모, 곰팡이 등 미생물의 영양세포를 사멸시키는 것

 - 멸균 : 따로 규정이 없는 한 미생물의 영양세포 및 포자를 사멸시키는 것

 

* 열 사멸 곡선(TDT Curve, Thermal Death Time)(Fig. 1)

 • 미생물의 사멸 속도에 미치는 온도의 영향을 나타내는 곡선으로, 로그 F를 가열 치사에 대하여 그린 곡선

 • 미생물의 치사 시간은 식품 속의 미생물 세포 수에 비례하며 가열 온도에 반비례한다.

 • 즉, 가열 온도가 높을수록 가열 시간을 짧게, 온도가 낮을수록 시간을 길게 하여 살균하여야 한다.

Figure. 1

 * 고압멸균(Fig. 2)

  • 세포의 내생포자를 파괴하기 위해서는 100℃ 이상에서 높은 증기압으로 멸균해야 한다.

   a. 내생포자(endospore)

    : 내생포자는 주로 bacillus나 clostridium 속(genus)에 속하는 종(species)들의 세포 안에서 포자화 과정을 거쳐 생성되는 독특한 형태의 휴면세포이다.

   b. 실험실에서 멸균을 할 때는 내생포자들을 죽이기 위해 대기압보다 높은 15 psi(pounds/square inch)의 압력 하에서 121℃의 온도로 15~20분 동안 가압증기멸균을 수행한다.

Figure. 2

* 오토클레이브(Autoclave)에 관한 안전 기술지침 [한국산업안전보건공단(2013.11) 발췌]

 • 오토클레이브의 위험성

  ① 오토클레이브에서 일어나는 가장 큰 위험은 안전장치의 중요 부품이 고장을 일으킬 때 내부에 축적된 에너지가 제어할 수 없을 정도로 갑작스럽게 방출되는 것으로 방출물로는 오토클레이브 장치의 부품, 가압시키는 물질(반응물질) 및 저장된 내용물 등이 있다.

  ② 밀폐된 문이 부서지면 위험한 증기 또는 고온의 유체 방출 또는 내부에서 부서진 장치 파편의 비산 등으로 이어지는 위험이 있다.

  ③ 오토클레이브 문은 완전히 닫히기 전에는 가압되지 않는 구조로 하고 문잠금기구의 기능이 완전히 작동하고 내부는 완전히 밀폐되어야 한다.

  ④ 뜨거운 내용물로부터 위험을 줄이기 위해서는 오토클레이브 내용물 온도가 안전수준까지 떨어질 때까지 문 또는 뚜껑은 열리지 않아야 한다.

  ⑤ 문을 열기 전에 오토클레이브의 지시계를 통해 잔여압력이 없음을 확인해야 한다.

 

* 고압증기멸균기 작업 단계별 주의사항

작업단계	위험요소	주의 및 조치사항
1. 재료 준비	가득 채운 트레이가 쏟아질 위험	멸균봉지의 제한 무게 초과 금지 멸균봉지를 가득 채우기 금지
	밀봉된 봉지 및 병 폭발 위험	멸균봉지를 느슨하게 묶기 병이나 용기의 뚜껑을 느슨하게 조이기 초자기구 등의 내열성 여부 확인
2. 고압멸균물질 운반	물질이 카트에서 떨어질 위험	무리하게 카트로 운반 금지 2중 용기를 이용하여 운반
	무거운 물건으로 인한 부상 위험
3. 고압멸균물질 적재	고압증기멸균기 문(뚜껑)을 열 때 독성 흄에 노출 위험	문(뚜껑)을 완전히 열기 전에 압력과 온도가 충분히 낮아진 후 수동밸브를 열어 남아있는 증기 제거
	문(뚜껑)을 열 때 뜨거운 증기로 인한 화상 위험	보안경 또는 안면마스크, 및 내열장갑 착용 고온증기가 발생하는 부위 앞에서 사용 금지
	증류수 추가 공급 시, 고온의 수증기 발생으로 화상 위험	보안경 또는 안면마스크 및 내열장갑 착용 증류수 보충 전에 안전온도 이하로 충분한 냉각 되었는지 확인 필요
	고압증기멸균기 내부 접촉으로 인한 화상 위험	내열장갑과 실험복 착용 고압증기멸균기가 너무 뜨겁다고 판단되면 문(뚜껑)을 넓게 열어서 멸균물질 적재 전에 냉각 필요
	무거운 물건으로 인한 부상 위험
4. 고압멸균 종료 후    고압멸균물질 내림	고압증기멸균기 문(뚜껑)을 열 때 독성 흄 노출 위험	문(뚜껑)을 완전히 열기 전에 압력과 온도가 충분히 낮아진 후 수동밸브를 열어 남아있는 증기 제거
	문(뚜껑)을 열 때 뜨거운 증기로 인한 화상 위험	보안경 또는 안면마스크 및 내열장갑 착용 고온증기가 발생하는 부위 앞에서 사용 금지
	고압증기멸균기 내부 접촉으로 인한 화상 위험	내열장갑과 실험복 착용 고압증기멸균기가 너무 뜨겁다고 판단되면 문(뚜껑)을 넓게 열어서 멸균물질 적재 전에 냉각 필요
	무거운 물건으로 인한 부상 위험
5. 쓰레기 처리	멸균물질 또는 재료가 쏟아질 위험	쓰레기를 옮기기 전에 강하게 밀봉 쓰레기를 옮기기 전에 새는 곳이 없는지 확인 만약 봉투가 샌다면, 다른 봉지에 넣기